【摘要】目的构建RBD+ODC及其突变体融合表达质粒,并进行验证。方法选取Ras下游效应分子Raf-1中能够与K-Ras蛋白相互作用的RBD+CRD氨基酸片段作为结合结构域,以ODC蛋白分子全长作为功能结构域。以正常人胰腺组织的c DNA为模板扩增相应的目的基因片段,应用分子克隆的方法通过在引物中引入GS片段使结合结构域和功能结构域相连并通过双轮PCR法在ODC功能位点引入突变,所获得的核苷酸片段均连入pc DNA3.1真核表达载体中。结果与结论经测序和Western Bolt验证,成功构建了RBD+ODC及突变体RBD+ODC的重组质粒,2种质粒均能够在人HEK293T细胞中正常表达。
【关键词】
《建筑知识》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
《中国医疗管理科学》 2015-05-12
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《当代体育科技》 2015-07-07
《重庆高教研究》 2015-06-30
《重庆高教研究》 2015-06-25
《重庆高教研究》 2015-06-30
010-56259535
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